Yra daug būdų, kaip išmatuoti bakterijų augimą, ir vienas būdas yra sudėtingesnis nei kitas. Nors kartais į matavimo nuoseklumą reikia nekreipti dėmesio, pakanka paprasčiausio būdo tiksliai išmatuoti bakterijų augimą, todėl jis dažnai naudojamas. Dažniausiai naudojami metodai yra bakterijų stebėjimas ir skaičiavimas, sausos arba šlapios masės matavimas ir drumstumo/drumstumo lygio matavimas. Jūsų mokyklos laboratorijoje turėtų būti įrankių ir įrangos, reikalingų bent vienam iš šių eksperimentų atlikti.
Žingsnis
1 metodas iš 3: gyvų bakterijų stebėjimas
Žingsnis 1. Paruoškite ingredientus
Yra daug specialių įrankių, kuriuos reikia paruošti ir kurių gali nebūti biologijos laboratorijoje. Prieš atlikdami eksperimentą, paruoškite visą įrangą ir konteinerius, kad proceso metu nebūtų jokių rūpesčių. Turėsite iš karto žinoti kiekvieną naudojamą ingredientą ir pagrindines šio eksperimento sąlygas.
- Paruoškite skaičiavimo kamerą. Jame yra įmontuota kamera, mikroskopo stiklas ir mikroskopas, todėl jį lengva nustatyti ir naudoti. Jį galite nusipirkti laboratorijoje ar mokyklinių prekių parduotuvėje. Šis įrankis turi turėti instrukcijas, kurios padės jums atlikti visą procesą.
- Paruoškite išpilstymo taurę arba tepimo taurę. Abu šie konteineriai leidžia stebėti viduje esančias bakterijas.
- Kultūra yra terminas, naudojamas apibūdinti organizmų augimą eksperimento metu.
- Sultinys yra skysta terpė, kurioje auga kultūra.
Žingsnis 2. Naudokite išpilstymo plokštės arba skleidimo plokštelės metodą
Taip pat galite įdėti bakterijas tiesiai į lėkštę, kad galėtumėte jas peržiūrėti mikroskopu. Užpilkite kultūrą ant lėkštės ir padėkite ją po mikroskopu. Stebėkite bakterijų ląstelių skaičių.
Žingsnis 3. Įsitikinkite, kad koncentracijos dozė yra teisinga
Jei jų bus per daug, bakterijos kaupsis viena ant kitos ir galite neteisingai apskaičiuoti. Praskieskite kultūrą, įmaišydami daugiau sultinio. Jei jų bus per mažai, skaičiavimo rezultatai nebus tikslūs. Sultinį nukoškite naudodami filtravimo sistemą.
Žingsnis 4. Skaičiuokite bakterijas
Paskutinis žingsnis yra suskaičiuoti bakterijas po vieną. Pažvelkite pro didinamąjį objektyvą skaičiavimo kameroje ir užsirašykite matomų bakterijų skaičių. Palyginkite rezultatus su kitų bandymų rezultatais.
2 metodas iš 3: sausos ir šlapios masės matavimas
Žingsnis 1. Įsitikinkite, kad turite tinkamą įrangą
Šis metodas naudoja brangią įrangą ir daug laiko. Jei jūsų laboratorijoje nėra reikiamos įrangos, verta naudoti kitą metodą. Tačiau jei jūsų laboratorija yra pakankamai gerai įrengta, rekomenduojame šį metodą, nes jis suteikia nuoseklesnius rezultatus. Taikant šį metodą, jums reikės:
- Hidraulinė gravitacinė konvekcinė orkaitė
- Svėrimo indas pagamintas iš aliuminio
- Kolbų rinkinys (laboratoriniai buteliai)
- Išcentrinė mašina (centrifuga) arba laboratorinė filtravimo sistema
2 žingsnis. Įsitikinkite, kad kultūra yra kolboje
Pridėkite kultūrą prie moliūgo. Šiame etape kultūra turėtų būti sultinys, nors vėliau ji vėl bus atskirta.
3 žingsnis. Išdžiovinkite aliuminio svėrimo indą laboratorinėje orkaitėje
Vietoj to galite naudoti celiuliozės acetato filtro membraną, kurios skersmuo yra 47 mm, o porų dydis - 0,45 µm. Nepriklausomai nuo naudojamo svėrimo konteinerio, pasverkite jį, nes vėliau jį reikės atimti sveriant bakterijų ląsteles.
4 žingsnis. Maišykite kultūrą kolboje, kol ji tolygiai susimaišys
Dėl sunkio jėgos ląstelė natūraliai nuskęs ir ją reikės maišyti, kad tolygiai pasiskirstytų kolboje. Tokiu būdu galite turėti daugiau pavyzdžių.
Žingsnis 5. Naudokite centrifugą, kad atskirtumėte bakterijų ląsteles nuo sultinio
Šis įrankis sukasi kolbą ir greitai subalansuoja, kad nuleistų sultinį ir paliktų kultūrą kolboje.
Žingsnis 6. Nuplėškite pastą ant moliūgo ir sudėkite į svėrimo indą
Išmeskite sultinį, nes jums jo nebereikia. Tačiau kol kas neatsisakykite moliūgo, nes jis vis tiek bus naudojamas.
Žingsnis 7. Išplaukite išcentrinę mašiną ir supilkite skalavimo vandenį į indą
Įlašinkite skalavimo vandenį į kolbą ant bakterijų ląstelių, kad gautumėte drėgną svorį.
Žingsnis 8. Raskite sausą svorį
Norėdami išmatuoti sausą svorį, įdėkite indą į orkaitę ir džiovinkite 100 ° C temperatūroje 6–24 valandas pagal orkaitės ir (arba) naudojamo svėrimo indo nurodymus. Įsitikinkite, kad temperatūra nėra per aukšta, kad bakterijos nesudegtų. Baigę pasverkite bakterijas ir nepamirškite rezultato sumažinti svėrimo indo svoriu.
3 iš 3 metodas: drumstumo matavimas
Žingsnis 1. Paruoškite reikiamą įrangą
Jums reikės šviesos šaltinio ir spektrofotometro. Abu galima įsigyti laboratorinių prekių parduotuvėse. Spektrofotometras turėtų turėti instrukcijas, kurios padės jums naudoti prietaisą pagal jūsų turimą modelį. Spektrofotometro kaina yra gana prieinama ir paprasta naudoti, todėl jis gali tapti vienu iš dažniausiai naudojamų metodų bakterijų augimui matuoti.
Žingsnis 2. Apšvieskite mėginį
Pagal Laymano terminą drumstumas yra mėginio drumstumo lygis. Turite gauti drumstumo matavimo numerį, kuris matuojamas NTU (nefelometrinis drumstumo vienetas). Norint tiksliai išmatuoti mėginį, šį įrankį reikia sukalibruoti.
Žingsnis 3. Įrašykite rezultatus
Drumstumui įtakos turi bakterijų skaičius mėginyje. Spektrofotometras taip pat parodys perdavimo procentą (%T). Šis skaičius padidės, jei drumstumas sumažės. Palyginkite rezultatus su kitų tyrimų, skirtų bakterijų augimui matuoti, rezultatais.
Įspėjimas
- Kadangi susiduriate su bakterijų kolonija, imkitės atsargumo priemonių dėvėdami apsauginę įrangą, tokią kaip apsauginiai akiniai ir pirštinės. Taip pat gera idėja dėvėti kaukę, ypač jei nežinote tiriamų bakterijų tipo.
- Prieš tvarkydami bet kokio tipo bakterijas, net ir nekenksmingas, imkitės atsargumo priemonių. Prieš pradėdami įsitikinkite, kad visos atviros žaizdos ant jūsų kūno yra visiškai uždengtos.
